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藥明生物首席技術官周偉昌:未來生物工藝技術發展趨勢

2022-01-19 08:30 8809

上海2022年1月19日 /美通社/ -- 近期,藥明生物首席技術官、執行副總裁周偉昌博士在專業期刊上發表了觀點文章,介紹了連續生產工藝、一次性生物反應器等新興技術對于促進未來生物工藝發展的作用,并分享了前沿洞見。以下為部分精彩觀點:

自1986年首個單克隆抗體(OKT3)獲批上市以來,FDA已經批準了100多個抗體類治療產品,其中包括單克隆抗體(mAb)、融合蛋白、抗體偶聯藥物(ADC)和雙特異性抗體(bsAb)。

尤其是2014年以來,獲批的抗體類藥物呈爆發式增長。上市產品超過70個,包括腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、抗PD-1和抗PD-L1抗體等,且重磅藥物頻出。2021年,生物制品的全球銷售額預計將超過3000億美元1,2。近年來,生物制品在全球藥品銷售排行榜中開始占據主導地位。例如,2021年的前9個月,銷售額位居前列的20種藥品中有13種是生物制品,其中包括兩款mRNA新冠疫苗和10款抗體類產品。

生物制品結構高度復雜,通常采用活細胞生產,并需要多個工藝步驟進行純化。其關鍵特征,即關鍵質量屬性(CQA),可以因為細胞內或者后續生產過程中發生的翻譯后修飾而產生差異。所以,工藝決定產品,基本上可以說“產品即工藝”3

回顧過去幾十年生物制藥行業的發展,盡管還面臨諸多技術和監管挑戰,業界在開發生物制品原液和制劑生產工藝,以及分析方法方面的努力已取得了巨大的成就,滿足了大量的臨床需求,拯救了眾多患者的生命。

隨著創新生物藥不斷涌現,如何在確保質量一致性的前提下加速產品上市,特別是應對不斷變化的新冠疫情,對業界提出了考驗。如下挑戰正推動著生物工藝創新,為以經濟高效的方式保障產品質量和穩定供應帶來了新方向:

加快產品從概念、臨床試驗到商業化進程

自新冠疫情發以來,業界迅速響應,通過多方協作加快了多個疫苗(包括兩種mRNA疫苗)和生物藥(包括多種抗體)的研發和生產。

抗新冠中和抗體產品開發涵蓋DNA序列設計,新藥臨床試驗申請以及獲批上市,為加快這一進程,業界在不影響產品質量和安全性的前提下,采用了一體化和變革性的技術方法:將產品從DNA到IND申請的時間縮短至3至6個月,并在14個月內完成新冠中和抗體從DNA到緊急使用授權(EUA)的過程。短短數月內就生產了數千公斤抗體,用于惠及全球患者臨床治療4

近來,新冠治療藥物研發達到了前所未有的推進速度,這可能會拉開生物制品研發變革的序幕,加速開發時間表也就成為未來生物工藝發展的重要特征之一。除繼續應用創新技術縮短研發時間外,生物工藝開發也將進一步聚焦于降低生產成本。更新、更小的“未來工廠” -- 綜合應用一體化連續生產工藝、一次性生物反應器、高度的數字化和自動化,不僅將提供更大的靈活性、更高的產量和更有效的空間利用率,同時也將降低生產成本。

新冠疫情為生物工藝帶來的變革也將有助于其他更復雜生物制品的研發,如抗體偶聯藥物和雙特異性/多特異性抗體。業界從快速研發新冠疫苗及生物制品中獲得的知識和經驗,也將更直接地應用于研發針對其他重癥的新型疫苗和治療性生物藥。未來,新型疫苗和生物藥的研發將打破傳統,不用再耗時10年之久。

自從治療性生物制品問世以來,為了提高產能和效率,生產用細胞系的選擇策略在不斷改進。這些最新進展使得業內可以重新制定化學、生產和控制(CMC)策略,并在短短三個月內生產出供應臨床試驗的產品。

DNA合成前的密碼子優化是實現高蛋白表達水平的常見方法。其算法基于使用特定宿主細胞系的專用密碼子和密碼子對,可能比基于使用通用密碼子數據庫的算法更為有效,有助于提高蛋白質在特定宿主細胞系中的表達水平。此外,由于該策略對瞬時轉染和穩定轉染細胞系表達系統均有效,因此定制密碼子的優化工作也有助于整個研發過程。

隨著多年來CMC開發進程不斷加快,毒理學研究采用從細胞群中獲得的蛋白物料已經獲得了全球各監管機構越來越多的認可。因此,選擇與毒理學研究蛋白具有相似產品CQA的最終克隆至關重要。需要強調的是,不采用基于液質聯用(LC-MS)的肽圖分析,而是采用基于下一代測序(NGS)的cDNA,以快速篩選出與早期研發所用細胞群中無任何序列變異的克隆。在克隆篩選期間,可同時進行細胞系穩定性傳代,以進一步縮短研發時間。

在復雜生物藥分子的研發過程中,通常會發生重組蛋白的截短或裂解,這也為下游純化工藝帶來了挑戰,同時也可能導致產量下降。細胞系選擇的早期階段通常采用批次補料,以篩選出剪切較少的克隆。而這再次證明,在研發早期深入了解產品和工藝進展有助于節省后期的大量時間、成本和精力。

更廣泛應用連續生產工藝和一次性生物反應器

未來,連續生產工藝將逐漸廣泛地應用單抗、雙抗、融合蛋白和重組蛋白等各種類型的生物藥生產。這一應用也反映了業界發展趨勢 -- 滿足更高質量、更高產量且更具有可及性的生物制品的日益增長的需求。

在上游工藝方面,灌流培養已廣泛應用于臨床和商業批次的生產 。與流加培養相比,灌流培養在產量、質量、靈活性和性價比方面均具有顯著優勢。先進的灌流培養系統 -- 如藥明生物自主開發的超高效連續生產技術平臺(WuXiUP?) -- 可將幾乎所有類型生物藥生產中的細胞密度和產量較流加培養提高5至10倍。此外,連續收獲可縮短產物在生物反應器中的停留時間,從而改善產品質量。

藥明生物超高效連續生產技術平臺WuXiUP(TM)
藥明生物超高效連續生產技術平臺WuXiUP(TM)

隨著一次性生物反應器、流穿層析和單向切向流過濾等技術的進步,連續生產技術已經在小試或中試規模成功實現連續下游工藝。然而,全行業在大規模應用上的投入卻略顯滯后。

采用自動化穩態灌流培養、不含細胞的連續收獲和延長產物收獲周期等技術,使連續生產上游工藝在產物表達水平方面取得了巨大進步。相應地是,在大規模生產中還需提高連續生產下游工藝產量5

人用藥品技術要求國際協調理事會(ICH)發布了一份關于原液和制劑連續生產的指導原則(Q13)草案6,目前正在對這份草案進行評審。業界普遍認為該草案將鼓勵連續生產工藝在生物制品研發和生產中的應用,而連續生產工藝很大程度上取決于部分或完全一體化的下游工藝單元操作。

對于這兩種連續生產下游工藝方案,一個可預見的瓶頸是缺乏高性價比的現成或定制的過程分析技術(PAT)工具以及用于過程監測和實時控制的自動化系統。在儀器和自動化控制解決方案供應商、學術界、工程師及整個生物制藥行業的協作努力下,該技術瓶頸有望在不久的將來得到突破,從而讓完全一體化連續生產下游工藝得到更廣泛的應用。

細胞系開發策略日趨先進,細胞培養基不斷優化,因此細胞培養產物表達水平得以不斷提高,占地面積較小的生物反應器的需求也隨之增加。再加上連續生產工藝,這些將進一步促進一次性生物反應器的普及。

擴大一次性技術在其他環節操作中的使用,如引入一次性切向流深層過濾系統和一次性離子交換膜層析裝置,可實現完整的一次性生產工藝。一次性技術也使得生產工廠的新型設計成為可能,例如采用模塊化生產單元,從而提供靈活的產能,縮短產品上市時間,不同產品間的靈活轉換,同時也可最大限度減少交叉污染。

目前,強化型連續生產技術已經成為顯著發展趨勢,這將有望提高采用這些技術所實現的產量。完全連續生產工藝可通過整合和協調不同單元操作工藝來實現,以最大限度縮短間隙時間和提高產能。采用連續生產工藝,也將減少大批量生物制品生產所使用設備的占地面積,并降低整體資本投入。

其他生物工藝進步還包括在大規模生產工藝中實施自動進料、自動采樣和最小化管路裝配,以實現更大規模的工藝控制,從而獲得更穩健的性能和產品質量。大規模生產中采用過程分析技術(PAT),如拉曼光譜,以及其他在線檢測方法,可實現重要工藝參數和性能的實時檢測和控制。

與毛細管電泳(CE)和高效液相色譜(HPLC)相比,基于多肽的多屬性方法(MAM)等其他新型分析技術具有更高的靈敏度和產物選擇性。此外,表面等離子體共振(SPR)和生物層干涉(BLI)等新興技術可加強產品放行中的工作流程。

應用PAT工具有兩項主要優勢:快速決策和先進的過程控制。現在行業內已開發多種PAT平臺,可用于在線監測連續性生物工藝過程中的產物聚集化和碎片化度7,以及自動控制活細胞密度8,這有助于開發更好的工藝,并加快CMC開發進度。

新一代抗體類藥物工藝發展趨勢

由于分子結構的復雜性,雙抗和抗體偶聯藥物等新型生物藥的工藝開發具有一定挑戰性。隨著全球抗體偶聯藥物研發產品線快速增長,業界對完全一體化的抗體偶聯藥物技術平臺服務的需求愈發強烈,以支持從DNA到 IND過程中的工藝開發和產品生產等環節。生物偶聯藥物的研發和生產不僅需要這些完全一體化的抗體偶聯藥物技術平臺,也需要抗體、連接子和偶聯技術等相關服務。除縮短DNA到IND的時間,一體化的抗體偶聯藥物技術平臺還具有降低開發過程中的風險等優勢。對這些技術平臺的需求,也反映出研發企業對偶聯工藝穩健性和藥物-抗體比(DAR)控制的更多關注。

偶聯技術涉及各種連接子機制以及不同的有效載荷、偶聯化學品、偶聯位點和藥物-抗體比。所有方面的多樣性也增加了生產過程中的可變性,使純化工藝和對抗體偶聯藥物結構和效價的分析過程變得復雜。在過去數年里,抗體偶聯藥物研發企業在改善這些復雜藥物的可開發性、可生產性和功能性能等方面取得了重大進展,但在將這些藥物模式推向更精簡的研發過程中,仍然面臨一定挑戰。為應對這些困難,生產企業需要采用更高水平的分析方法。

在雙抗生產過程中,鏈錯配、鏈表達不平衡和組裝不完全等工藝過程中產生的相關副產物對下游純化工藝提出了相當大的挑戰。為幫助生產企業處理不同種類及含量水平的副產物,研究人員提出了一種基于工具箱的雙抗純化方法9

除了為雙抗量身定制的下游方法外,灌流細胞培養還可以顯著提高雙抗的質量(例如,通過提高單體的百分比,其以Caliper或者毛細管等電聚焦分析確定)。因此,相比傳統的補料分批培養,灌流細胞培養是更好的選擇方法10。本文所討論用于雙抗研發的下游和上游策略也可應用于多特異性抗體研發。

盡管生物制品研發仍然存在相關挑戰,尤其是抗體偶聯藥物和雙抗等新型和復雜的藥物分子,但業界已通過新型分析工具、高通量矩陣驅動的實驗設計來應對這些挑戰。相對于多年以前,得益于以藥明生物為代表的更加全面、一體化和單一來源的生物技術賦能平臺,以及吸取抗擊新冠疫情中生物藥研發的相關知識經驗,企業將更快實現研發出性價比更高的治療性生物藥和疫苗。

參考文獻

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8. Chen G, Hu J, Qin Y, Zhou W. Viable cell density on-line auto-control in perfusion cell culture aided by in-situ Raman spectroscopy. Biochem. Eng. J. 2021; 172: 108063.

9. Li Y, Wang Y, Shen K, Zhou W. A roadmap for IgG-like bispecific antibody purification. In: Matte A, ed. Approaches to the Purification, Analysis, and Characterization of Antibody-Based Therapeutics. Elsevier; 2020: 167–179.

10. Qin Y, Ma R, Li Y, et al. Productivity and quality improvement for a bispecific antibody through the application of intensified perfusion cell culture. Unpublished data, 2021.

原文鏈接:https://www.genengnews.com/topics/bioprocessing/secure-the-future-of-bioprocessing/

消息來源:藥明生物 (WuXi Biologics)
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